甘薯中6花青素(矢車(chē)菊素、芍藥素、天竺葵素、錦葵素、矮牽牛素、飛燕草素)含量的測(cè)定簡(jiǎn)介

 

 

 

測(cè)定原理

 

甘薯中花青素主要以花色苷的形式存在。試樣經(jīng)甲醇-水的鹽酸溶液超聲提取花色苷后，經(jīng)沸水浴發(fā)生氯化，水解成帶氯離子的花青素，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定，以特征離子對(duì)和保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

 

 

 

試劑

 

甲酸（CH2O2，CAS號(hào)：64-18-6）：色譜純。

 

甲醇（CH3OH，CAS號(hào)：67-56-1）：質(zhì)譜級(jí)。

 

乙腈（C2H3N，CAS號(hào)：75-05-8）：質(zhì)譜級(jí)。

 

鹽酸（HCl，CAS號(hào)：7647-01-0）：優(yōu)級(jí)純。

 

 

標(biāo)準(zhǔn)品

 

氯化天竺葵素（PelargonidinChloride）：CAS號(hào)134-04-3，純度≥96%。

 

氯化矢車(chē)菊素標(biāo)準(zhǔn)品

 

氯化矢車(chē)菊素（CyanidinChloride）：CAS號(hào)528-58-5，純度≥96%。

 

氯化芍藥素（PeonidinChloride）：CAS號(hào)134-01-0，純度≥96%。

 

氯化錦葵素（MalvidinChloride）：CAS號(hào)643-84-5，純度≥96%。

 

矮牽牛色素標(biāo)準(zhǔn)品

 

氯化矮牽牛素（PetunidinChloride）：CAS號(hào)1429-30-7，純度≥96%。

 

氯化飛燕草素（DelphinidinChloride）：CAS號(hào)528-53-0，純度≥96%。

 

 

單標(biāo)貯備液

 

1mg/mL的單標(biāo)儲(chǔ)備液：甲醇中氯化天竺葵素、甲醇中氯化矢車(chē)菊素、甲醇中氯化芍藥素、甲醇中氯化錦葵素、甲醇中氯化矮牽牛素、甲醇中氯化飛燕草素

 

 

步驟

 

試樣制備

 

甘薯薯塊或葉片樣品用凍干機(jī)凍干后用粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，過(guò)250μm篩后在-20°C環(huán)境條件下保存，備用。

 

提取

 

準(zhǔn)確稱取100mg甘薯凍干粉末放入2mL離心管，加入提取液（5.2.1）1.5mL，振蕩均勻，常溫超聲提取10min，8000r/min常溫離心3min，保留沉淀，吸取上清液轉(zhuǎn)移至10mL離心管，反復(fù)提取4次，總收集液定容至6mL。

 

水解

 

將收集的上清液于沸水浴中水解1h，取出后自來(lái)水沖淋收集上清液的離心管，使溶液冷卻至室溫，用0.22μm有機(jī)相濾膜過(guò)濾待測(cè)。樣品制備后，在4°C避光環(huán)境條件下，保存時(shí)間不超過(guò)3d。7.4液相色譜、質(zhì)譜條件設(shè)置

 

 

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